一、名词解释

1． cDNA 文库（cDNA library）。

【答案】以mRNA 为模板，利用反转录酶合成与mRNA 互补的DNA 称为cDNA , 单链的eDNA 再复制双链的 DNA 片段，与适当的载体连接后，转入受体菌，所建立的文库称为cDNA 文库。

2． 顺式作用（cis-acting ）。

【答案】顺式作用是指位于DNA 上的序列组件只对其自身下游的序列起作用。

3． 异头碳。

【答案】异头碳是指环化单糖的氧化数最高的碳原子。异头碳具有羰基的化学反应性。

4． 内源因子

【答案】内源因子是胃幽门黏膜分泌的一种糖蛋白，

维生素

被吸收，

且不被肠细菌破坏。缺乏内源因子可导致维生素

5．

复制叉

【答案】

复制叉是指复制时，

在

的Y

型结构。在复制叉处作为模板的双链

6． 酶活性的可逆磷酸化调节。 只有与它结合才可能透过肠壁的缺乏。 链上通过解旋、解链和解旋，

同时合成新的蛋白的结合等过程形成链。

【答案】酶活性的可逆磷酸化调节是指通过蛋白激酶催化的将A TP 或CTP 的位磷酸基转移到

底物蛋白质氨基酸残基上以及在蛋白磷酸化酶催化下的逆过程，从而使酶蛋白在活性状态与非活性状态之间互变，来调节酶的活性

7．

端粒酶

【答案】

端粒酶

为模板催化端粒

8． 转角。

【答案】转角是指在蛋白质的多肽链中经常出现180°的回折，在肽链回折处的结构，也

是一种自身携带模板的逆转录酶，

由的合成，

将其加到端粒的和蛋白质组成，组

分中含有一段短的模板序列与端粒. 的重复序列互补，而其蛋白质组分具有逆转录酶活性，

以

端，以维持端粒长度及功能。 称弯曲，

或称发夹结构。它一般由4个连续的氨基酸残基组成，由第一个氨基酸残基的C-0与

第四个氨基酸残基的N-H 之间形成氢键，

使转角成为比较稳定的结构。

二、问答题

9． 如果丙氨酸的甲基碳被标记，那么通过糖异生作用，葡萄糖的哪个碳原子将被标记？

【答案】葡萄糖的C1和C6位将被标记。

10．（1）当氨基酸：Ala 、Ser 、Phe 、Leu 、Arg 、Asp 和His

的混合物在

哪些氨基酸 移向正极（+ ） ? 哪些氨基酸移向负极（-）？

（2）纸电泳时，有相同电荷的氨基酸常可少许分开，例如Gly 可与Leu 分开。你能解释吗？ （3

）设有一个的Ala , Val, Glu, Lys和Thr 的混合液，试回答在正极（ + ）、负极

所以

状态）。Ala 、（一）、原点以及末分开的是什么氨基酸？ 【答案】（1） Ala 、Ser 、Phe 和的pi 值均接近6, 因为pi

就是净电荷为零时的时，

这些分子都具有净正电荷（即部分竣基处于状态.

而全部氨基处于进行纸电泳时，

Ser 、Phe 和Leu 均移向负极，His 和Arg 的PI 分别为7.6和10.8，且不能分开。它们移向负极，为3.0的Asp 则移向正极。His 和Arg 能与移向负极的其它氨基酸分开。

（2）电泳时具有相同电荷的较大分子比较小分子移动得慢，因为电荷对质量之比比较小，因此每单位质量引起迁移的力也比较小。

（3）

比较值，表明Glu 带有净负电荷，移向正极；Lys 带有净正电荷，移向负极，在

时，Val , Ala 和Thr 均接近它们的等电点。虽然Thr 可能与Val 和Ala 分开，但在实际上并不能完全分开。但在实际上并不能完全分开。

11．维生素的特点是什么？

【答案】维生素是一类维持机体正常生命活动所必不可少的低相对分子质量有机化合物。机体对其需要量很少。但由于机体不能合成或合成量不足，所以必须从食物中摄取。

12．凝胶过滤和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳这两种分离蛋白质的方法均建筑在分子大小的基础上，而且两种方法均采用交联的多聚物作为支持介质，为什么在凝胶过滤时，相对分子质量小的蛋白质有较长的保留时间，而在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，它又“跑”得最快？

【答案】凝胶过滤常用的是葡聚糖凝胶（Sephadex ），这凝胶颗粒的交联介质排阻相对分子质量较大的蛋白质，仅允许相对分子质量较小的蛋白质进入颗粒内部，所以相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶颗粒之间的空隙中通过。这意味着它通过柱的体积为床体积减去凝胶颗粒本身所占的体积。而相对分子质量小的蛋白质必须通过所有的床体积才能流出，所以，相对分子质量小的蛋白质比相对分子质量大的蛋白质有较长的保留时间。而SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，其凝胶介质并不存在像Sephadex 那样的颗粒之间的空隙。所以，所有的蛋白质分子必须全部通过这交链介质而移动。蛋白质的相对分子质量越小，通过这介质就越快，移动得越迅速。

13．在体外进行DNA 复制实验时，如果将大肠杆菌DNA 聚合酶I 与T7 DNA保温20min 以后，加入大量T3 DNA。如果改用大肠杆菌DNA 聚合酶III 取代大肠杆菌DNA 聚合酶I 进行上述实验，则得到的主要是T7 DNA。请解释原因。

【答案】大肠杆菌DNA 聚合酶I 和DNA 聚合酶III 的进行性不同，前者只有后者高达500000 nt。进行性低意味着DNA 聚合酶I 在催化DNA 复制过程中很容易与模板解离，进行性高则意味着DNA 聚合酶III 可以 在模板上连续合成更长的DNA 。使用DNA 聚合酶I 进行实验时，因为它的进行性低，合成一小段DNA 以后， 就与原来的T7 DNA模板解离，在加入大量的T3 DNA以后，DNA 聚合酶I 很难与原来的模板结合，反而更容易与量多的T3 DNA结合，复制T3 DNA，于是被合成的DNA 主要是T3 DNA; 使用DNA 聚合酶III 进行实验时， 因为它的进行性极高，故在有限的时间内，DNA 聚合酶III 几乎不会离开原来的模板T7 DNA，即使加入的T3 DNA 量再多，对原来的T7DNA 复制也没有影响，因此最后合成的DNA 主要是T7DNA 。

14．以不同浓度的丙酮酸为底物，测定乳酸脱氢酶酶促反应速度得到以下一些数据（见表）:

表

（1）计算乳酸脱氢酶在该反应条件下的

（2）当丙酮酸浓度为

（3）当丙酮酸浓度为

【答案】

⑴

（2

）当

当

（3

） 值。 时，反应速度V 是多少？ 时，如果酶浓度加倍时，V 会是多大？

15．McArdle 病由肌肉中糖原磷酸化酶缺陷导致，Her 病由肝中糖原磷酸化酶缺陷导致。尽管这两种酶在不同组织中催化同样的反应，但Her 病有可能导致生命危险，而McArdle 病只会在运动时产生问题。请写出糖原磷酸化酶催化的反应，并解释这两种病在严重性上的差别。

【答案】糖原磷酸化酶催化的反应是：（糖原）+Pi-（糖原）H+G-1〜P

由于G-1-P 在肝细胞中变构成G-6-P 后即可由其磷酸酶水解为葡萄糖并输出，因此肝糖原的降解对于保持血糖水平的稳定非常重要。糖原磷酸化酶一旦发生缺陷，肝糖原将不能有效降解而影响血糖水平的正常调节，严重时可能导致生命危险。

反之，肌细胞中没有G-6-P 磷酸酶，因而肌糖原的降解对于维持血糖稳定几乎没有作用，其